产品货号:
GS4924
中文名称:
小分子量蛋白凝胶制备试剂盒
英文名称:
Tricine-SDS-PAGE Gel Preparation kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒提供了配制Tricine-SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制Tricine-SDS-PAGE胶。Tricine-SDS-PAGE胶可分离常规SDS-PAGE不易分离的小于10 KD的蛋白及多肽,与市面在售Tricine胶相比,有电泳时间短,凝胶快等特点。本试剂盒约可配制50块常规大小的PAGE胶。
组分 | 规格 |
49.5%T 3%C | 10mL |
49.5%T 6%C | 150mL |
Gel Buffer | 150mL |
Glycerol | 40mL |
APS | 0.5g |
TEMED | 600μL |
Gel Buffer和APS室温保存。49.5%T 3%C、49.5%T 6%C和TEMED 4℃避光保存。APS配制成10%溶液(0.5g APS加5mL纯水)后,分装成小管-20℃保存,通常半年内有效。
- APS配制成10%溶液后,应当-20℃保存。同时应尽量减少室温存放时间,以防失效。
- TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切,可通过适当调节TEMED的用量,控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度,配置胶时TEMED最后加入。
- 产品中的保存条件及有效期均以未开封情况下计算,为了防止产品与空气接触发生化学反应影响产品性能,将未使用完毕的组分按存储要求保存同时建议开封后的组分尽快使用完毕。
- 建议水压时,缓慢加入水珠,速度过快会使分离胶上层浓度不均,影响后续染色照相。
- 建议在4℃环境或常温冰浴下进行电泳实验,防止电流过大,造成温度升高,烧胶等现象。
- TEMED易燃,有腐蚀性,请注意防护。
- 根据样品的情况选择合适的胶浓度并按照下表中的配方配置分离胶。
- 将配置好的分离胶加到已经固定好的玻璃板间,等待其凝固。
- 待分离胶凝固后,按照下表中的配方配置浓缩胶,将配置好的浓缩胶加到已经固定好的玻璃板间,并插上梳子,等待其凝固。
组分 分离胶 浓缩胶 20%/7mL 16.5%/7mL 15.5%/7mL 4%/2mL 49.5%T 3%C / / / 0.16mL 49.5%T 6%C 2.83mL 2.33mL 2.17mL / Gel Buffer 2.33mL 2.33mL 2.33mL 0.496mL Glycerol 0.75mL 0.75mL 0.75mL / H2O 1.09mL 1.59mL 1.52mL 1.344mL 10% APS 62μL 62μL 62μL 20μL TEMED 7.78μL 7.78μL 7.78μL 3μL
- 按表格中配方,配制所需浓度的分离胶,水压凝结,待分离胶完全凝固后,继续按配方配制浓缩胶,插上梳子,待胶凝固后在电泳槽底部加入稀释10倍体积的正极缓冲液(货号:GS2000),将制好的胶连同其装置放入电泳槽内,在两块胶之间注入稀释10倍体积的负极缓冲液(货号:GS1503),用30 V的电压空胶预电泳10min,然后上样(Marker可使用百奥莱博的预处理小分子蛋白Marker,货号:GS4535),建议上样量为5~10μL,也可购买阴阳极电泳缓冲液套装(货号:GS1508),使用时无需稀释直接电泳,方便可靠。
- 150 V进行电泳实验,直至溴酚蓝抵达分离胶底部,,取出凝胶进行染色照相。整个电泳过程在冰浴或4℃进行。
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